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新闻中心

人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒实验原理

发布时间:2018-05-29浏览次数:1116返回列表



中文名:人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明
英文简称:Human α1-microglobulin,α1-MG ELISA kit
供应商:上海樊克
规格:48T , 96T
存储条件: 频繁使用时(2-8摄氏度),较长时间储存时(-20摄氏度)
有效期:2-8摄氏度2周,-20摄氏度 存放6个月
使用范围:本产品仅科研实验,严禁用于临床使用



检测中样品的处理:
1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。
5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。



 使用原理:
1,ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2,结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
3,在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
4,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。
5,此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
6,由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。




注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。