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基因组核酸和Rnase清除:核糖核酸酶

发布时间:2020-05-15浏览次数:346返回列表

    核酸分解的第1步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键,在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶,其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,称为核糖核酸酶(RNase)。



    催化RNA水解的一种核酸内切酶。反应产物是单核苷酸和寡核苷酸。不同核糖核酸酶催化产物的低聚核苷酸组成有差别。核糖核酸酶T1使之产生单核苷酸和以3'-鸟苷酸为组成的或末端为3'-鸟苷酸的低聚核苷酸。核糖核酸酶T2使之产生单核苷酸和以3'-腺苷酸为组成的或末端为3'-腺苷酸的低聚核苷酸。

    绝大部分的核糖核酸酶需要二价阳离子作为辅因子(例如Ca,Mg等)。因此活性可因乙二胺四乙酸(EDTA)的存在而阻断。胰核糖核酸酶是3'-嘧啶核苷酸由红酵母发酵液提制而得的核糖核酸酶,其药用油膏可局部外用于治疗外伤及关节疼痛。

    有催化活性的核糖核酸(RNA)。是1981年切赫(T.Cech)zui先发现的,以后由他命名,尚无统一的中文译名。和酶(蛋白质催化剂)相比,细胞内的RNA催化剂是极少的。现在已知的几十种天然RNA催化剂的绝大部分参与RNA的加工和成熟。按它们的作用方式可分为剪切型(把RNA前体的多余部分切除),和剪接型(把RNA前体的内含子部分切除并把不连续的外显子部分连接起来)。根据所作用的底物不同,又可分成自体催化和异体催化两类。绝大多数RNA催化剂以自身为底物进行自体催化,可以是自我剪切,也可以是自我剪接。RNA催化剂比酶的催化效率低,有的RNA催化剂具有多种酶的功能。如原生动物四膜虫的rRNA前体的内含子序列具有核糖核酸酶等5种酶的活性,其水解RNA的速率为每分钟两次,而胰RNA酶的作用速率则为每秒钟数千次。切赫和阿尔特曼(S.Altman)因对RNA催化剂研究的突出贡献,共获1989年度诺贝尔化学奖。

    1.由红霉素产生的蓖的发酵液提取。

    2.以牛胰为原料,稀硫酸匀浆后用硫酸铵分级沉淀,再经重结晶、羧甲基纤维素柱层析得产品。

    3.以牛胰为原料稀酸抽提后用硫酸铵分级沉淀,在乙醇中重结晶制取