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新闻中心

实验室用不完的血清可以反复冻融吗

发布时间:2020-05-25浏览次数:276返回列表

    血清作为细胞培养重要耗材经常被使用,但是有时候血清不能一次性用完很多人会冻起来下次接着用,这样做会影响血清品质吗?


    曾有研究发现,血清冻融三次,对肿瘤标志物的浓度影响不大,对于血浆,有报道在短时间内反复冻融三次,对总蛋白、白蛋白和免疫球蛋白含量影响不大,但作者推测对免疫球蛋白的活性有影响。zui重要的是一篇西北民族学院的文章,《反复冻融新生牛血清对促细胞生长效应的影响》,作者针对SP2/0细胞,用MEM培养基和三批新生牛血清进行培养。血清分别冻融4次至28次不等。然后绘制细胞生长曲线,根据公式t =T/A , A=log2

    Y/X计算细胞倍增时间(t 为细胞倍增时间, Y 为细胞峰值前1 d 的细胞数, X 为接种细胞数, T 为细胞生长时间)。结果显示:选用的三批新生牛血清在反复冻融 28 次时, 血清促细胞生长的zui大增殖量变化不大,均高于1×106/mL, 但是血清促细胞生长的倍增时间在反复冻融 20次时延长, 即血清促细胞繁殖一代所需的时间在冻融次数达到 20 次时显著增加。笔者观察了一下该文章的结果列表,发现在冻融20次之前,细胞倍增时间延长2-3小时不等,20次时,则延长3-4小时。可见,影响还是比较显著的。该文章的局限是针对新生牛血清,而没有对胎牛血清进行测试。

    国外有人对大鼠血清中的18种化学成分进行了检测,发现反复冻融3次对其中的14种成分没有显著影响,其他肌酸激酶,甘油三酯,葡萄糖,胆红素,甚至包括氯离子有一些明显变化,但其浓度变化控制在10%以内。

    总而言之,如果能避免牛血清的反复冻融,及时分装,那是zui理想的。如果在短时间内有几次反复冻融,也不必guo于担心。但是,对于胎牛血清,还有一个问题,是反复冻融增高了血清产生沉淀或浑浊的风险。因为血清在融化时,冰块和蛋白融化的速度是不一样的,局部可能因蛋白浓度过高而产生沉淀。同时,如果血清内含有少量纤维蛋白原,那么在低温下也可以形成絮状沉淀,等到血清再融化时,沉淀就显现出来了。所以,血清的极速快三也非常重要