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上海复祥生物ATCC细胞传代方法

发布时间:2020-02-11浏览次数:1696返回列表

  ATCC细胞传代方法:
  收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
  (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
  (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
  1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
  2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
  3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。
  注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。

  冻存方法: 冻存液:95%完全培养液,5%DMSO
  储存:液氮储存